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支原體檢測

支原體檢測

2021年科鑒基因平臺的支原體檢測法已更新為熒光PCR+毛細管電泳。替代原來的PCR法+恒溫法,靈敏度更高、更精確。

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北京科鑒基因中心

北京科鑒基因中心

等級: [專業(yè)機構]

評價: 4.9分

中心公告:結果客觀真實反應??商峁┥祥T采集樣本服務,接收國內(nèi)外郵寄樣本(僅限個人鑒定)。同時提供STR分型檢測技術培訓和解決方案。

溫馨提示: 周六日提前一天預約,安排值班接待辦理。

中心地址:北京市海淀區(qū)

辦理時間:周一到周日:9:00-17:00(周六日提前一天預約)

  • 項目詳情
  • 鑒定須知
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  • 平臺信息
  • 中心點評(11)
  • 立即預約

項目用途:??細胞培養(yǎng)液是否有支原體污染。

項目規(guī)格:??熒光PCR+毛細管電泳

檢測周期:??5-7個工作日。

辦理方式:??郵寄樣本,上門取樣。

樣本類型:??細胞懸液、細胞保存卡、細胞懸液、細胞凍存液、DNA

樣本要求:??細胞數(shù)量大于1000000個,DNA大于400ng

2021本平臺的支原體檢測法已更新為熒光PCR+毛細管電泳。替代原來的PCR法+恒溫法,靈敏度更高、更精確。該方法可覆蓋ATCC/DSMZ報道的細胞培養(yǎng)支原體污染中常見的10大類55個亞種的污染。

 

支原體檢測
在細胞培養(yǎng)過程中,支原體感染的情況常有發(fā)生。當細胞(特別是傳代細胞)被支原體污染后,細胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達會發(fā)生改變,而細胞的生長率通常并未發(fā)生顯著的影響,因此細胞被支原體污染一般難以察覺。美德華生使用支原體特異性引物擴增細胞培養(yǎng)樣本,與含有支原體的陽性標準品和不含有支原體的陰性標準品比對,便可知道細胞樣本中是否含有支原體。除此之外,還可以根據(jù)擴增產(chǎn)物的片段大小判斷污染細胞的支原體的種類。

PCR法檢測的支原體

13種支原體大約占污染細胞的支原體種類的99%左右,因此PCR能達到99%;
+恒溫法則能達到99.9%。

科鑒基因可以提供PCR法+恒溫法支原體檢測。暫不提供培養(yǎng)法支原體檢測。

《PCR法支原體檢測試劑盒》可用于檢測一切可能含支原體的樣品,比如:

(1)體外細胞培養(yǎng)的上清;
(2)血清;
(3)各種體液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;
(4)別的液體樣品。本產(chǎn)品僅供研究使用。
產(chǎn)品簡介
    哺乳動物細胞的培養(yǎng),支原體(Mycoplasma)污染是個世界性的問題。支原體污染幾乎可以改變細胞的所有參數(shù),導致實驗結果的不準確、甚至完全錯誤(支原體污染對細胞的詳細危害,請參考本公司的網(wǎng)站:www.yisemed.com)。從2013年開始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及細胞培養(yǎng)都要進行支原體檢測。相信會有越來越多的高水平期刊將做出同樣的支原體檢測要求。
    培養(yǎng)法是相對可靠的支原體檢測技術,但是該方法非常耗時的,需要數(shù)周,不適合作為細胞培養(yǎng)液中支原體污染的快速檢測。此外,通過固體培養(yǎng)法無法檢測污染細胞的一種最常見的支原體,即豬鼻支原體(M.Hyorhinis)。這是因為豬鼻支原體無法在支原體固體培養(yǎng)基上形成可見的菌落。而豬鼻支原體約占所有支原體污染的20-50%。
    有的實驗室使用熒光染色法檢測支原體,但是該方法靈敏度太低,當檢測成陽性時,細胞經(jīng)常已經(jīng)嚴重污染。
    本公司已經(jīng)開發(fā)出了專用于體外細胞培養(yǎng)的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》,與PCR法支原體檢測相比,其具有許多優(yōu)點:耗時短、靈敏度高、操作簡單、不會被細胞代謝產(chǎn)物抑制、結果無需電泳肉眼可直接判斷等。
    盡管如此,《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》可能也有個小缺點:因為《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》需要至少同時使用4條引物才能完成擴增,其引物設計相對困難。雖然經(jīng)我們測試,該試劑盒至少可認識其說明書中列舉的13種支原體,而這13種支原體大約占污染細胞的支原體種類的99%左右。但是,不排除《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》無法識別個別在體外細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)概率極低的支原體。為此,我們特意開發(fā)了具有廣譜識別能力的《PCR法支原體檢測試劑盒》。

    經(jīng)測試,本公司開發(fā)的《PCR法支原體檢測試劑盒》至少可以識別在體外細胞培養(yǎng)中曾經(jīng)報道出現(xiàn)的20種支原體,根據(jù)文獻報道,這些支原體基本上占污染細胞的支原體種類的100%。具體如下:(1)M. hyorhinis、(2)M. fermentans、(3)M. arginini、(4)M. hominis、(5)M. orale、(6)M. salivarium、(7)M.pirum、(8)Acholeplasma laidlawii、(9)M. agalactiae、(10)M. bovis、(11)  M. bovoculi、(12)Acholeplasma axanthum、(13)M. buccale、 (14) M. pneumoniae、(15)M. arthritidis、(16)M. pulmonis、(17)M. gallisepticum、(18)M. gallinarum、(19)M. canis、(20)Ureaplasma urealyticum(注:M.為Mycoplasma的縮寫)。
如果客戶發(fā)現(xiàn)除上述20種支原體外,還有其他的支原體也會污染體外培養(yǎng)的細胞,或者客戶純粹就是想檢測其他的支原體,請告訴我們支原體的名稱,我們將進行序列比對,然后告訴你本試劑是否可以識別。此外,根據(jù)支原體DNA的序列,本試劑盒可以識別100多種至今已發(fā)現(xiàn)的支原體,具有廣譜的識別能力。
 
    此外,作為支原體檢測領域的共識,單獨使用任何一種支原體檢測方法,都無法做到100%正確,既不會漏檢(假陰性),也不會多檢(假陽性)。嚴格的支原體檢測,至少需要使用兩種(最好使用三種)不同原理的支原體檢測方法同時進行檢測,才能使檢測結果接近100%正確。
 
    如果您想得到100%正確的支原體檢測結果(比如,開展細胞治療的客戶,進行干細胞培養(yǎng)的客戶,生產(chǎn)血清、胰酶、培養(yǎng)液的客戶,出售各種原代培養(yǎng)細胞系和腫瘤細胞系的客戶等),任選本公司生產(chǎn)的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》、《PCR法支原體檢測試劑盒》和《發(fā)光法支原體檢測試劑盒》中的兩種進行檢測,將會得到比較滿意的結果,檢測的正確率應該在99.9%以上。如果同時使用這三種試劑盒進行檢測,檢測的正確率應該在99.99%以上。
平臺信息

法醫(yī)物證鑒定平臺

法醫(yī)物證鑒定平臺是遵照中華人民共和國司法部頒布的鑒定機構管理辦法,經(jīng)北京司法局核準登記的專業(yè)司法鑒定平臺。

法醫(yī)物證鑒定平臺業(yè)務

鑒定領域:司法親子鑒定、個人親子鑒定、移民親子鑒定、落戶親子鑒定、胎兒親子鑒定、親緣關系鑒定、DNA身份識別、線粒體DNA檢測、基因身份證、DNA尋親覓祖及種屬鑒定等鑒定項目。

北京科研技術平臺

北京科研技術平臺是國內(nèi)早期一批從事DNA檢測研究的平臺。其STR分型檢測技術較早應用親子鑒定和細胞鑒定,領銜建設協(xié)助國內(nèi)多家DNA實驗建設和人員培訓,向行業(yè)輸送大量的DNA檢測研發(fā)工作者。同時開發(fā)了基因檢測行業(yè)新的多種產(chǎn)品,為STR分型檢測行業(yè)貢獻力量。在親子鑒定和細胞鑒定上有著延續(xù)十多年的經(jīng)驗,同時產(chǎn)前無創(chuàng)親子鑒定技術,有著較高的質量控制標準。

北京科研技術平臺業(yè)務

鑒定領域:個人親子鑒定、產(chǎn)前無創(chuàng)親子鑒定、個體識別、人源細胞STR鑒定、小鼠細胞STR鑒定、種屬鑒定、猴源細胞鑒定、倉鼠細胞鑒定、大鼠細胞鑒定、HLA分型、支原體檢測(熒光PCR+毛細管電泳)、核型分析(NGS技術)、精斑血斑確認。

中心點評(11)

4.8

專業(yè)水平:4.9分服務水平:4.9分位置環(huán)境:4.8分

全部(20) 交通便利(6) 服務熱情(5) 法醫(yī)專業(yè)(5) 解讀清晰(3) 還會再來(1)

  • 相關項目
  • 鑒定中心
  • 專注親子鑒定十年

    行業(yè)早期DNA檢測研究團隊

  • 引領無創(chuàng)親子鑒定技術

    上萬個SNP位點的質控標準

  • 免費解讀報告

    共同探索人類遺傳的奧秘

  • 專注細胞鑒定十年

    多家科研院所長期檢測服務

  • 科研級和工業(yè)級檢測

    STR分型檢測技術培訓和解決方案

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