隨著高通量DNA檢測技術(shù)的發(fā)展,在擴增之前需要有快速自動化的DNA定量檢測技術(shù)。為此,英國法庭科學服務(wù)部( FSS)開發(fā)了PicoGreen檢測法,可在96孔微量滴定板上檢測少至0. 25ng/ml的雙鏈DNA。PicoGreen是一種熒光螯合染料,當與雙鏈DNA結(jié)合時,它的熒光信號顯著增強。
進行微量滴定板定量時,在195出含有PicoGreen染料的溶液中加入5出的樣品。每份樣品放在96孔板單獨的一個孑L中,用熒光計檢測。96孔板包括80個檢測樣本和16個校準樣本,30分鐘內(nèi)可完成分析。這些樣本通過與標準曲線做比較得到定量結(jié)果。這種定量對調(diào)整STR復合擴增反應中DNA的加入量很有幫助。而且此方法已在機械臂式工作站上實現(xiàn)自動化。它的缺點是對樣本中總的DNA進行定量,對人類DNA沒有特異性。
DNA鑒定-Picogreen微量滴定板定量
2020-11-04 22:36:14 來源: 科鑒基因
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