焦磷酸測(cè)序法(pyrosequencing)的原理是在單管中的每一輪測(cè)序反應(yīng)中只加入一種dNTP，若該dNTP與模板配對(duì)，DNA聚合酶就可以將其摻人到引物鏈中并釋放出等摩爾的焦磷酸基團(tuán)(PPi)，PPi最終被特定的酶轉(zhuǎn)化為可見光信號(hào)，并由檢測(cè)設(shè)備量化為一個(gè)峰值，每個(gè)峰值的高度與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比(Ahmadian et a1．，2006; Ronagi，2001)。隨即加入下一種dNTP，繼續(xù)DNA鏈的合成，直到讀出全鏈的序列。相對(duì)于傳統(tǒng)測(cè)序技術(shù)面言．pyrosequencing是一項(xiàng)全新的DNA測(cè)序技術(shù)，不需要電泳，對(duì)于較短的目標(biāo)片段（如100bp左右）尤其有效，甚至可以在lOmin內(nèi)準(zhǔn)確地完成其序列測(cè)定，十分快捷、準(zhǔn)確。