許多新穎的基因分型方法始終在溶液中進(jìn)行,故稱之為均相反應(yīng),其中一些從反應(yīng)開始即無需更多的干預(yù),另外一些則需要添加試劑的步驟,但無需分離純化。均相反應(yīng)通常很穩(wěn)定,靈活性高,無需大量勞動,但其最大的缺陷是多重平行反應(yīng)數(shù)量有限。固相反應(yīng)是將反應(yīng)起始物錨定在固相載體上,生化反應(yīng)在載體表面進(jìn)行,最終的目標(biāo)產(chǎn)物與載體連接,過量的反應(yīng)起始物、中間產(chǎn)物等經(jīng)過簡單的洗滌即可除去,極大地簡化了反應(yīng)中分離純化的過程?;蚍中椭惺褂玫墓滔噍d體包括載玻片、硅基片、顏色編碼微球(微球所特有的顏色是識別探針的記號,微球在溶液中的反應(yīng)較剛性片基更為充分)、微孔板的孔壁等。在一種策略中,寡核苷酸陣列作為反應(yīng)器集合,靶DNA分子找到對應(yīng)物后,大量分型反應(yīng)在上面平行進(jìn)行;在另一種策略中,寡核苷酸陣列用于對均相反應(yīng)中進(jìn)行的分型反應(yīng)的產(chǎn)物進(jìn)行分類(也平衍進(jìn)行)。在兩種情況中,寡核苷酸在微陣列中的特定位置是已知的,通過判斷季一個特定的寡核苷酸與陽性信號相關(guān)即可推斷基因分型結(jié)果。在固相載體上連廳基因分型的主要優(yōu)點(diǎn)是可以同時分析大量遺傳標(biāo)志物(SNP)。除了節(jié)省時間、節(jié)約試劑外,平行進(jìn)行大量反應(yīng)降低了標(biāo)本結(jié)果混淆的可能性,其主要缺點(diǎn)是陣列設(shè)計和多重反應(yīng)的優(yōu)化需要大量資金及時間的投入。
DNA鑒定之SNP分型方法和技術(shù)的反應(yīng)形式
2020-11-04 22:36:19 來源: 法醫(yī)物證學(xué)
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