年齡推斷是法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重要課題之一,尤其是涉及青少年犯罪、推斷高度腐敗甚至白骨化的無名尸年齡等案件時(shí),可為尸源的查找提供線索、縮小偵查范圍。另外,根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)遺留生物物證推斷嫌疑人年齡在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中也具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
傳統(tǒng)的個(gè)體年齡評(píng)估主要是依據(jù)骨骼、牙齒等組織以及組織中各類物質(zhì)的物理和化學(xué)特性等隨年齡增長(zhǎng)的時(shí)序性變化來判斷,而當(dāng)法醫(yī)樣本為組織殘缺碎片、毛發(fā)、斑跡等時(shí),這種方法往往受到限制無法實(shí)現(xiàn)或者存在較大誤差。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,一系列與發(fā)育和衰老相關(guān)的變化指標(biāo)在分子水平上被檢測(cè)到,為法醫(yī)案件樣本年齡推斷提供了新的思路和方向,并被嘗試作為法醫(yī)學(xué)年齡推斷的候選標(biāo)記,主要有以下四點(diǎn)。
1.氨基酸外消旋化
人體中合成的氨基酸都是L型光學(xué)異構(gòu)體,但隨著時(shí)間的推移,L型氨基酸逐漸向D型轉(zhuǎn)化(即外消旋化),尤其在骨骼、牙齒、晶狀體、椎間盤、肺等早期形成而又更新緩慢的組織中,L型和D型氨基酸的比例隨著年齡的增長(zhǎng)呈穩(wěn)定變化的趨勢(shì),這就意味著,測(cè)定組織中L型和D型氨基酸的比例可以作為法醫(yī)年齡推斷的研究方向之一。
2.端粒DNA長(zhǎng)度
端粒作為真核細(xì)胞線性染色體末端的一種特殊結(jié)構(gòu),起著穩(wěn)固基因組、保護(hù)染色體末端、決定核內(nèi)染色體定位及調(diào)控體細(xì)胞復(fù)制的作用。隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加、端粒長(zhǎng)度不斷縮短,而生物體年齡的增長(zhǎng)往往伴隨著細(xì)胞的分裂增長(zhǎng),這就為人們提供了一種以組織細(xì)胞為標(biāo)本、以分子水平檢測(cè)為工具的年齡評(píng)估方法,進(jìn)而有可能解決法醫(yī)學(xué)中案件痕跡樣本年齡評(píng)估的難題。
3.線粒體損傷
隨著個(gè)體年齡的增長(zhǎng),組織細(xì)胞內(nèi)積累的自由基不斷增多。自由基具有氧化性,可對(duì)DNA造成氧化性損傷。由于線粒體DNA沒有蛋白的保護(hù),更容易產(chǎn)生損傷。動(dòng)物體具有修復(fù)抗自由基損傷的能力,但隨著年齡的增加,修復(fù)能力逐漸下降,通過檢測(cè)合適的線粒體損傷標(biāo)志物,可以作為年齡推斷的指標(biāo)。
4.DNA甲基化
DNA甲基化與個(gè)體年齡之間同樣存在關(guān)系,在細(xì)胞衰老和器官老化的過程中,這些表觀遺傳修飾發(fā)揮了重要作用。研究發(fā)現(xiàn)多個(gè)甲基化位點(diǎn)與衰老過程線性相關(guān),不同組織中DNA的甲基化水平會(huì)隨年齡的增長(zhǎng)而升高或降低。
分子生物學(xué)年齡推斷方法不僅能克服傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)年齡推斷方法的局限性,且可通過一些特殊的微量檢材進(jìn)行年齡評(píng)估。目前這方面的研究還存在很多問題,主要是其觀測(cè)指標(biāo)易受環(huán)境、遺傳、疾病等的影響,存在著人群和組織器官的差異等。同時(shí),由于同一種指標(biāo)檢測(cè)的方法有多種,如何做到實(shí)驗(yàn)流程的標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控體系的建立,也是需要考慮的問題。
雖然上述分子生物學(xué)指標(biāo)各有局限,但它們之間又互有聯(lián)系。若將這些指標(biāo)綜合考慮,構(gòu)建一個(gè)年齡相關(guān)的衰老網(wǎng)絡(luò),然后將網(wǎng)絡(luò)各點(diǎn)精確量化,這樣不僅可以建立測(cè)定年齡相關(guān)的衰老程度的量化公式,還有助于闡明衰老的分子機(jī)制。隨著實(shí)驗(yàn)手段的日益進(jìn)步,這一目標(biāo)將會(huì)實(shí)現(xiàn)。